5ta semana

En este jueves 11 de junio, realizamos una electroforesis con distintas muestras de ADN, y visualizamos los resultados en rayos Ultravioleta comprobando si habia ADN o no en esas muestras (de las que teoricamente habiamos extraido el ADN por metodo comercial) y en que cantidad. Otro metodo que realizamos con el mismo fin fue realizar una dilucion 1:100 y realizar una espectrofotometria, para con los niveles de absorbancia obtener la concentracion de ADN Como la cuba era de mas volumen realizamos esa dilucion la volvimos a diluir obteniendo asi una dilucion final de 1:200 y las absorbancias obtenidas las mutiplicamos por 2.

Para realizar la electroforesis preparamos el gel del agarosa de la siguiente manera:

40 ml de buffer (10X diluido 1:10)
400 mg de agarosa
Microondas durante 1 minuto.
3 microlitros de colorante (SYBR safe)

Luego lo colocamos en la cubeta con el peine dejandolo solidificar con el peine durante 15 minutos para que se formen las calles, previamente habiamos calibrado con una burbuja, cheuqeando que el gel se solidifque de manera regular a lo largo de la superficie, y sin desniveles. En la electroforesis tambien sembramos productos de PCR (metodo por el cual se amplifica cierto segmento de ADN que uno elige) para comprobar si las enzimas que polimerizan funcionaban todas correctamente (estos productos se habian obtenido a partir de una PCR con distintas TAQpol).

Proximamente subiremos al blog fotos y desarrollaremos el metodo de PCR y la extraccion de ADN comercial.

Saludos